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英文名：T7 RNA Polymerase

本酶來源于由大腸桿菌表達(dá)，表達(dá)基因?yàn)槭染wT7 RNA Polymerase基因，是一種高度特異識(shí)別T7啟動(dòng)子序列的DNA依賴的5"→3"RNA聚合酶。T7 RNA Polymerase可以催化單鏈或雙鏈DNA T7啟動(dòng)子下游NTP的摻入，合成與T7啟動(dòng)子下游的模板DNA互補(bǔ)的RNA。

特點(diǎn)：T7 RNA Polymerase可以識(shí)別修飾的NTP，例如生物素標(biāo)記、地高*(代"辛")標(biāo)記、熒光素標(biāo)記的NTP，可以用于各種標(biāo)記RNA的合成。同時(shí)對(duì)于T7啟動(dòng)子有高度的特異性。

活性定義： 37℃60分鐘內(nèi)，催化1 nmol AMP摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定義為1個(gè)活性單位。

活性檢測條件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[3H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific T7 RNA Polymerase promoter sequence。

純度：不含DNA內(nèi)切酶和外切酶，不含RNA酶。

酶儲(chǔ)存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。

失活或抑制：70℃加熱10分鐘可使T7 RNA Polymerase失活。加入適量EDTA也可以使T7 RNA Polymerase失活。螯合劑、濃度大于150mM的鈉、鉀或銨鹽可以顯著抑制T7 RNA Polymerase的活性。

用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：雜交探針，基因組DNA序列分析，核糖核酸酶保護(hù)測定(RNase protection assay)，反義RNA合成，作為體外翻譯的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)和RNA-蛋白質(zhì)相互作用，核酸擴(kuò)增分析，siRNA、miRNA等小RNA。

保存：-20℃