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    核糖核酸酶T1/Rnase T1

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    英文名稱:Ribonulease T1 from Aspergillus oryzae;Rnase T1
    CAS號:9026-12-4

    級別:BR
    分子量:11.2kDa,單體
    來源:大腸桿菌細(xì)胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克隆基因rntA
    濃度:1000U/ul
    活力定義:1個(gè)活性單位是指37℃,pH7.5條件下,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長吸光值增加1.0所需的酶量
    酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
    保存緩沖液組分:50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
    質(zhì)量控制:相關(guān)測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、蛋白酶污染,功能檢測方法為質(zhì)粒DNA純化過程中的RNA降解(與RNase A協(xié)同作用)
    抑制劑:金屬離子Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+(MgCL2, 100mM濃度時(shí)抑制效率約40%;CaCL2,10mM濃度時(shí)抑制效率約30%;Zn2+、Fe2+和Cu2+在1mM時(shí)抑制效果很強(qiáng))、單核苷酸(2-GMP,3-GMP等)、guanilyl-2-5-鳥苷
    失活:熱失活是可逆的,建議采用過柱純化或苯酚/氯仿抽提除去該酶
    性狀:核糖核酸酶 T1是一種內(nèi)切酶,在G殘基位點(diǎn)特異性降解單鏈RNA。該酶通過形成核苷2′,3′-環(huán)磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵。反應(yīng)產(chǎn)物是3′-GMP末端寡核苷酸。RNase T1發(fā)揮活性無需金屬離子參與
    用途:生化研究。除去DNA抽取物中的RNA;RNA測序;核糖核酸酶保護(hù)分析,與RNase A協(xié)同作用;除去重組蛋白抽提物中的RNA;檢測G-less cassette DNA模板體外轉(zhuǎn)錄合成的RNA轉(zhuǎn)錄子水平
    保存:-20℃

     

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